描述
Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒
产品信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
| Yeast Transformation Kit 酵母转化试剂盒 | MF2501-200T | 200T | 838 |
【温馨提示】：见我司懋康生物整理的酵母双杂交（Yeast two-hybrid assay）产品专题。
产品描述
本酵母转化试剂盒（Yeast Transformation Kit）是基于高效的聚乙二醇/醋酸锂（PEG/LiAc）方法来制备和转化酵母菌感受态细胞的一款试剂盒，操作简单快捷，适用菌株广泛，能用于多个质粒的共同转化。每个试剂盒可做200次质粒的转化。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 规格 | 储存方法 |
| MF2501-A | 1M LiAc Solution 1M醋酸锂溶液 | 50 ml | 室温保存 |
| MF2501-B | 50% PEG Solution 50%PEG溶液 | 50 ml | 室温保存 |
| MF2501-C | Carrier DNA (5mg/ml) 载体DNA（5mg/ml） | 2×1ml | -20ºC保存 |
保存与运输方法
保存：Carrier DNA置于-20ºC保存，其他室温保存，1年有效。
运输：冰袋运输。
注意事项
- 第一次使用Carrier DNA，需要将装Carrier DNA的整个管子置于沸水中煮沸5min，然后立即放在冰上，之后放在-20ºC保存。下次使用时需在冰上解冻Carrier DNA。
- PEG溶液低温情况下会析出，使用前最好常温温育确保完全溶解才使用。
- 酵母转化整个过程请无菌操作。
- 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
一、酵母感受态细胞的制备
1.1 取-80℃保存的甘油菌在YPDA固体培养基上划线，30℃培养2-4天以活化菌种。
1.2 挑取酵母单菌落在YPDA固体培养基上划3-5mm短线，30℃培养2-4天。待酵母单菌落生长至2mm时，接种。
1.3 挑取酵母单菌落接种到3ml YPDA液体培养基，30℃培养过。
1.4 之后转接到含30ml YPDA液体培养基的三角瓶中继续培养，直至OD600达到0.4-0.5范围。1000g离心5min，去上清。
1.5 用30-50ml无菌去离子水重悬沉淀细胞。1000g离心5min，去上清。
1.6 用适当体积的100 mM LiAc悬浮（30ml酵母菌最多用不超过1ml的100mM LiAc悬浮，通常每个质粒转化反应需要的酵母感受态细胞为100μl）。
1.7 将上述重悬的细胞用枪轻轻混匀后，按照100μl/管的量分装，每管用于一个质粒转化反应。1000g离心5min，去上清，置于冰上，此时感受态细胞准备好待用。
二、酵母转化
2.1 按照以下体系制备转化用混合液，每个转化反应需360μl的混合液。
| 1M LiAc Solution | 36 μl |
| 50% PEG Solution | 240 μl |
| Carrier DNA (5mg/ml) | 10 μl |
| 质粒（~ 200 ng/μl） | 5 μl（根据质粒的浓度加入相应的体积） |
| 总体积 | 360μl |
-
- 2.2 取360μl转化混合液加入上述制备好的感受态细胞，用枪轻轻反复吹吸菌体，使得管底的酵母细胞充分悬浮。
- 2.3 置于30℃水浴锅孵育30min，每10min轻轻混匀一次。
- 2.4 置于42℃水浴锅热激30min，每10min轻轻混匀一次。
- 2.5 12000rpm离心1min，去掉上清液。
- 2.6 往沉淀内加入100μl无菌去离子水，重新悬浮。并转移到相应的酵母培养平板上，用无菌玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。室温正置10 min，待液体被吸收后，倒置平板，30℃培养2-4天。
相关产品
| MS6303-350G | YPDA Agar Medium YPDA琼脂培养基 | 350g |
| MS6304-250G | YPDA Medium YPDA液体培养基 | 250g |
| MS6311-467G | Minimal SD Agar Base SD琼脂基础培养基 | 467g |
| MS6312-267G | Minimal SD Base SD基础培养基 | 267g |
| MS0002-1ML | Aureobasidin A（AbA）金担子素A（1 mg/ml） | 1ml |
| MF2003-25MG | X-α-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷 | 25mg |
| MF2001-1G | X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷 | 1g |
| MF2501-200T | Yeast Transformation Kit酵母转化试剂盒 | 200T |
| MF2351-300UL | Y2HGold Yeast Strain酵母双杂交用甘油菌 | 300μl |
| MF2352-100UL | Y2HGold Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 | 100μl |
| MF2353-300UL | Y187 Yeast Strain 酵母双杂交用甘油菌 | 300μl |
| MF2354-100UL | Y187 Chemically Competent Cell 酵母菌化学感受态细胞 | 100μl |
| MF3601-20UL | pGBKT7 DNA-BD Vector酵母双杂交克隆载体 | 20μl |
| MF3602-20UL | pGBKT7-53 Vector酵母双杂交对照载体 | 20μl |
| MF3603-20UL | pGBKT7-Lam Vector 酵母双杂交对照载体 | 20μl |
| MF3604-20UL | pGADT7-AD Vector酵母双杂交克隆载体 | 20μl |
| MF3605-20UL | pGADT7-T Vector酵母双杂交对照载体 | 20μl |
— —Written/Edited by V. Shallan【版权归欧宝网址入口 生物/MKBio懋康所有】
